文献类型： 中文期刊

作者： 刘威 ¹ ; 袁芳艳 ¹ ; 周丹娜 ¹ ; 刘泽文 ¹ ; 杨克礼 ¹ ; 段正赢 ¹ ; 郭锐 ¹ ; 蔡行 ¹ ; 肖少波 ¹ ; 田永祥 ¹ ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/动物胚胎与分子育种湖北省重点实验室;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

关键词： 猪肺炎支原体;脂蛋白;LppT;多克隆抗体

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2017 年 19 期

页码： 220-223

收录情况： 北大核心

摘要： 试验构建猪肺炎支原体重组表达质粒pET30a-LppT,通过快速定点突变试剂盒将LppT基因中513、945、1 860、2 547 bp处的A突变为G,使改造后的LppT基因能在大肠杆菌系统中正确表达,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行了蛋白纯化,纯化的目的蛋白与佐剂混合、乳化制备免疫原,免疫新西兰大白兔制备LppT蛋白多克隆抗体。SDS-PAGE分析结果显示,IPTG诱导表达后获得1条特异性蛋白条带,分子质量约为110 ku,与预期蛋白大小一致。可溶性分析结果表明目的蛋白以可溶形式表达于上清中,纯化的蛋白经SDS-PAGE分离后,用制备的LppT多克隆抗体进行Western Blot检测,结果表明制备的LppT多克隆抗体具有较强的特异性。