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灰茶尺蠖CYP4G15基因克隆分析及对茚虫威胁迫的表达响应

文献类型: 中文期刊

作者: 刘丰静 1 ; 李金玉 1 ; 李慧玲 1 ; 张辉 1 ; 王定锋 1 ; 李良德 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院茶叶研究所

关键词: 灰茶尺蠖;茚虫威;细胞色素P450

期刊名称: 茶叶学报

ISSN: 2096-0220

年卷期: 2024 年 65 卷 005 期

页码: 63-71

摘要: 【目的】克隆灰茶尺蠖(Ectropis grisescens Warren)细胞色素P450基因CYP4G15,并对其进行生物学信息和表达特征分析,为进一步研究灰茶尺蠖解毒代谢和抗性机理提供依据。【方法】采用RT-PCR技术克隆CYP4G15基因的编码区。利用生物信息学软件分析该基因的生物学信息、序列特征及与其他近缘物种的P450基因的系统进化关系。采用RT-qPCR技术测定该基因在灰茶尺蠖不同发育阶段以及茚虫威胁迫后的表达特征。【结果】克隆获得了灰茶尺蠖CYP4G15基因,该序列开放阅读框全长1 572 bp,编码523个氨基酸,预测氨基酸序列相对分子质量为59.85 KD,理论等电点为8.85,预测蛋白结构存在细胞色素P450家族的保守结构域,该基因与夜蛾科的草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)等亲缘关系较近。RT-qPCR分析发现,CYP4G15在3龄、4龄幼虫中表达最高,卵表达最低,且雄性蛹和成虫表达量显著高于雌性。3龄灰茶尺蠖幼虫在茚虫威LC20和LC50剂量处理下,CYP4G15均被诱导表达,且在48 h后表达量最高,分别较对照提高了7.16倍和3.65倍。【结论】CYP4G15基因可能在灰茶尺蠖对茚虫威解毒过程中发挥重要作用,为今后灰茶尺蠖解毒代谢研究和抗虫新靶点筛选提供依据。

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