文献类型： 中文期刊
作者： 张 月秋 1 ; 傅 芳奇 1 ; 张 华 1 ; 陈 一帆 2 ; 王 晨尧 1 ; 蒋 红叶 1 ; 李 亚辉 3 ; 廖 一尘 1 ; 王 丹 1 ; 孙 宇 2 ; 付 伟 1 ; 陈 红 1 ;
作者机构： 1.农业农村部科技发展中心
2.上海市农业科学院
3.江苏省农业科学院
关键词： 转基因大豆;实时荧光定量PCR;LP012-1转化体
期刊名称：
ISSN： 2095-2341
年卷期： 2025 年 15 卷 2 期
页码： 276-286
摘要： 转化体标准化检测方法为生物育种产业化的应用和定量标识制度实施提供了重要的技术支撑。基于插入序列左边界的信息，以耐除草剂大豆LP012-1转化体为研究对象，建立了实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）检测方法。以外源插入序列位点左边界为靶标序列设计引物及其相应的探针，筛选获得了最优的引物组合，并优化引物探针浓度和退火温度，确定线性动力学范围在0.018~100 ng，检出限和定量限分别为0.05%、0.10%；正确度、精密度、实验室内稳健性和实验室间的联合验证误差均小于25%。研究建立的qPCR检测方法特异性好、灵敏度高、稳健性强，可以为耐除草剂转基因大豆LP012-1的安全监管提供技术支撑，并服务于生物育种商业化。
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