文献类型： 中文期刊

作者： 顾昀 ¹ ; 周晓丽 ² ; 袁秀芳 ² ; 杜晓莉 ² ; 徐丽华 ² ; 李军星 ² ; 方维焕 ¹ ; 王一成 ² ;

作者机构： 1.浙江大学

2.浙江省农业科学院

关键词： 猪流行性腹泻病毒;重组N蛋白;ELISA

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2015 年 30 卷 01 期

页码： 123-129

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了检测猪血清中猪流行性腹泻病毒抗体水平,用纯化的猪流行性腹泻病毒N基因重组表达蛋白作为包被抗原,建立了检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为0.5μg/m L,包被时间4℃过夜,5%脱脂乳的PBS封闭37℃2 h及4℃过夜。血清稀释度为1∶100;37℃作用45 min,辣根过氧化物酶标记兔抗猪Ig G稀释度为1∶10 000,37℃温育60 min,底物显色37℃15 min。抗体临界值为OD450nm≥0.30判为阳性,OD450nm≤0.27判为阴性,介于二者之间判为可疑。经重复性试验和交叉试验,结果表明,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。用已建立的ELISA方法检测临床血清样本184份,总阳性率为68.5%。