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PRSV运动相关病毒蛋白的Sos恢复系统诱饵载体构建及自激活效应检测

文献类型： 中文期刊

作者： 沈文涛 1 ; 周鹏 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 番木瓜环斑病毒;病毒运动;Sos恢复系统;酵母双杂交系统

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2008 年 29 卷 03 期

页码： 363-368

收录情况： CSCD

摘要： 为研究与番木瓜环斑病毒运动相关的病毒蛋白(CP、HC-Pro、CI)互作的寄主因子,构建以Sos恢复系统为原理的胞质酵母双杂交系统的3个病毒蛋白诱饵载体,并检测其自激活作用来验证是否适用于后续的文库筛选。通过RT-PCR从番木瓜环斑病毒海南分离物中扩增出这3个病毒蛋白的片段,按正确方向将目标片段分别插入诱饵载体pSos中,并将重组质粒导入酵母温度敏感酵母菌株cdc25H,检测其表达产物对酵母Sos恢复系统Ras信号通路的激活作用而产生的细胞温敏特性影响。结果表明,这3个含番木瓜环斑病毒运动相关的病毒蛋白的诱饵载体构建正确,对酵母菌株cdc25H的Sos恢复系统无激活作用,激活试验为阴性。

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