文献类型： 中文期刊

作者： 房良 ¹ ; 蒲金基 ¹ ; 张贺 ¹ ; 李鸿鹏 ¹ ; 吴秋玉 ¹ ; 钟昌开 ¹ ; 刘晓妹 ¹ ;

作者机构： 1.海南大学热带农林学院海南大学热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室

关键词： 杧果露水斑病菌;杧果细菌性黑斑病菌;双重PCR检测体系

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2019 年 02 期

页码： 539-544

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 杧果露水斑病和细菌性黑斑病在国内杧果产区普遍发生,严重威胁杧果安全生产,俗称杧果"两病"。建立准确高效的检测方法,提早检出杧果两病并及时采取防治措施,可有效减轻为害。本实验通过筛选反应体系和电泳条件,建立了可同时检测杧果中的露水斑病菌和细菌性黑斑病菌的双重PCR检测体系。结果表明:25μL反应体系,2×Taq PCR MasterMix 12.5μL,引物ML-SF9/SR5 (10μmol/L)各1.5μL、XcmHF/HR(10μmol/L)各1μL,模板各1μL,加ddH2O补足至25μL。反应条件为94℃预变性4 min;94℃变性45 s,65℃退火45 s,72℃延伸1 min,35个循环;72℃延伸5 min。电泳检测条件为1.5%琼脂糖凝胶浓度、120 V电压电泳25 min。该体系检测下限为杧果露水斑病原菌g DNA 0.224 ng/μL、细菌性黑斑菌液2.6×1~04cfu/m L。该技术可应用于田间杧果"两病"的早期检测与鉴定工作中。