文献类型： 中文期刊

作者： 吴文静 ¹ ; 孙鹤宸 ² ; 康伟 ³ ; 胡健伟 ³ ; 高倩 ³ ; 王翠华 ³ ;

作者机构： 1.大连海洋大学水产与生命学院

2.大连海洋大学海洋科技与环境学院

3.中国水产科学研究院东海水产研究所

关键词： 塔玛亚历山大藻;重组酶聚合酶扩增技术;横向流动试纸条;快速检测

期刊名称： 上海海洋大学学报

ISSN： 1674-5566

年卷期： 2025 年 34 卷 005 期

页码： 956-967

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了满足塔玛亚历山大藻（Alexandrium tamarense）在野外环境中快速检测的需求，以塔玛亚历山大藻内转录间隔区（Internal transcribed spacer, ITS）序列为靶标，设计了特异性引物和探针，将重组酶聚合酶扩增技术（Recombinase polymerase amplification, RPA）与横向流动试纸条（Lateral flow dipstick, LFD）相结合（RPA-LFD），实现了扩增结果的可视化。结果显示，RPA最佳反应条件为42℃、15 min,LFD检测时间为3 min。研究结果表明，基于RPA-LFD技术开发的塔玛亚历山大藻检测方法具有高度特异性，与常见藻类无交叉反应，能够特异性检出塔玛亚历山大藻。该方法对塔玛亚历山大藻质粒和细胞的检出限分别达到1 copies/μL和1 cells/L，较常规PCR提高了2个数量级。从特异性、灵敏度、便携性及时效性等方面综合评估，该方法可为实现塔玛亚历山大藻藻华的早期预警以及提升口岸对物种入侵的检测效率提供支持。