文献类型： 中文期刊
作者： 胡艳平 1 ; 蔡兴来 1 ; 周曼 1 ; 王敏 1 ; 朱白婢 1 ; 黄文枫 1 ; 廖道龙 1 ; 陈贻诵 1 ;
作者机构： 1.海南省农业科学院蔬菜研究所海南省蔬菜生物学重点实验室海南省瓜菜育种工程技术研究中心
关键词： HSP90基因;原核表达;条件优化;水芹
期刊名称： 分子植物育种
ISSN： 1672-416X
年卷期： 2019 年 009 期
页码： 2886-2891
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 植物热激蛋白90 (HSP90)在响应高温胁迫中起到重要作用.本研究从水芹中克隆到HSP90基因(基因登录号:MF961800),将其连接到原核表达载体pET30a上,构建重组质粒pET30a-OjHSP90.对大肠杆菌菌株BL21表达重组蛋白的起始菌液浓度、IPTG浓度、诱导温度和诱导时间进行了优化.结果显示,OjHSP90基因在大肠杆菌中可实现诱导表达,目的蛋白分子质量约为80 kD,与预期结果相符.当重组菌的起始OD600值达到0.8时表达量最高,pET30a-OjHSP90的最佳IPTG诱导浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导温度为37℃,最适诱导时间为4 h.本研究通过诱导条件的优化可以使目的蛋白的表达量显著增加,以期为研究OjHSP90的耐热功能提供理论依据.
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