文献类型： 中文期刊

作者： 孙少慧 ¹ ; 张静华 ¹ ; 杨帅 ¹ ; 高云飞 ¹ ; 闵凡祥 ¹ ; 马纪 ¹ ; 吕典秋 ¹ ; 金光辉 ¹ ; 王晓丹 ¹ ;

作者机构： 1.黑龙江八一农垦大学;黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所

关键词： 载体构建;基因克隆;效应因子;植物病毒表达载体

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2019 年 05 期

页码： 144-149

摘要： 马铃薯晚疫病病原菌致病疫霉菌(Phytophthora infestans)在侵入寄主细胞的同时分泌效应因子(Effector),该类蛋白在晚疫病致病过程中发挥着关键作用,是抑制植物免疫的重要因素。PITG_RD24是马铃薯晚疫病菌位于细胞核核的一个重要效应因子。为了快速鉴定效应因子RD24在马铃薯中瞬时表达的状况及抗性情况,构建效应子RD24的PVX表达载体是十分必要的。本研究利用PCR、酶切、分子克隆等生物学技术,将RD24片段连接插入至PVX (pGR106)载体中,然后用热击法将连接产物转化至大肠杆菌DH10B感受态细胞中。通过PCR筛选、质粒提取、测序比对,结果表明成功获得含有目的表达载体pGR106·RD24的质粒,可为下一步筛选马铃薯广谱抗病基因研究提供必备载体。