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IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 周宇 1 ; 王永山 2 ; 范红结 2 ; 欧阳伟 2 ; 唐雨德 2 ; 王忠灿 2 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心

2.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心;南京农业大学动物医学院;南京军区军事医学研究所

关键词： 传染性法氏囊病病毒;VP2基因;抗原表位;组合基因;表达

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2010 年 10 期

页码： 1301-1306

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBac HT中,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac HT-VP2-5e,用脂质体法转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒vBac HT-VP2-5e。对vBac HT-VP2-5e感染的Sf9细胞,以间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;电镜检查,重组VP2-5e蛋白能够自组装成病毒样颗粒(VLP);用免疫印迹分析(Western-blotting),在59 000处出现一条特异性蛋白条带。本试验为组合基因型重组IBD多价疫苗的研究奠定了基础。

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