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农杆菌介导的海岛棉茎尖再生体系及其遗传转化影响因子的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 翁琴 1 ; 陈全家 1 ; 孔庆平 2 ; 张国政 1 ; 武金玲 1 ; 曲延英 1 ;

作者机构： 1.新疆农业大学农学院

2.新疆农科院经济作物研究所

关键词： 海岛棉茎尖;遗传转化;根癌农杆菌;BT基因

期刊名称： 新疆农业大学学报

ISSN： 1007-8614

年卷期： 2007 年 30 卷 04 期

页码： 63-67

摘要： 采用根癌农杆菌LBA4404和EHA105介导,对海岛棉的茎尖再生体系及其转化影响因子进行了研究。茎尖培养与棉花体细胞胚胎发生相比,不同基因型的茎尖再生频率差异不明显;在9种不同的激素组合中,以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L与1/2MSB5+IBA 0.1 mg/L对茎尖的再生效果较好;获得较高转化频率的海岛棉培养条件为:海岛苗茎尖在OD600值为0.6~0.8农杆菌菌液中感染20~30 min,共培养3 d后进行转接,在含有不同激素和抗生素的各类培养基中进行抑菌和筛选继代培养,选择压以50~150 mg/L梯度进行;农杆菌以EHA105菌株的转化效果较好;抗性苗用SDS-CTAB法提取其总DNA,进行PCR扩增检测,有7株PCR检测呈阳性反应。由此,初步证明外源抗虫基因已经进入到再生植株的细胞核中。

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