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大菱鲆HEPCIDIN抗菌肽基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

文献类型: 中文期刊

作者: 李伟 1 ; 陈松林 2 ; 赵晓杰 2 ;

作者机构: 1.长江大学生命科学学院

2.农业部海洋渔业可持续发展重点实验室

关键词: 大菱鲆(SCOPHTHALMUS MAXIMUS);HEPCIDIN;抗菌肽;表达

期刊名称: 长江大学学报B(自然科学版)

ISSN: 1673-1409

年卷期: 2007 年 4 卷 003 期

页码: 84-87

摘要: 通过同源克隆结合RACE的方法从大菱鲆(SCOPHTHALMUS MAXIMUS)肝脏中克隆了大菱鲆HEPCIDIN抗菌肽基因全长CDNA(GENBANK ACCESSION NUMBER AY994074).大菱鲆HEPCIDIN基因CDNA全长778 BP,包含有1个273 BP的开放阅读框,编码1个长90氨基酸的前体肽.将大菱鲆HEPCIDIN抗菌肽基因的成熟肽序列重组至原核表达载体PGEX-4T-1中,用IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳显示在29 KU处有特异性蛋白条带出现,表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,融合蛋白约占总蛋白的26%.WESTERN-BLOTTING分析发现表达的融合蛋白可以特异性地与GST抗体相识别.这些结果表明大菱鲆HEPCIDIN抗菌肽基因成功实现了原核表达.

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