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马铃薯SSR-PCR体系的优化与建立

文献类型: 中文期刊

作者: 李建武 1 ; 李高峰 1 ; 胡新元 1 ; 国宏 1 ; 魏子杰 2 ;

作者机构: 1.甘肃省农业科学院马铃薯研究所

2.甘肃农业大学生命科学技术学院

关键词: 马铃薯;SSR-PCR;优化

期刊名称: 中国马铃薯

ISSN: 1672-3635

年卷期: 2013 年 06 期

页码: 331-335

摘要: 以马铃薯叶片DNA为模板,采用单因素试验的方法,对影响马铃薯SSR-PCR反应体系的主要成分模板DNA、dNTP浓度、引物浓度、Mg2+浓度、Taq酶浓度及退火温度进行了优化,并建立最优化的马铃薯SSR扩增反应体系。结果表明:在20μL反应体系中,模板DNA用量为60 ng,dNTP为0.3125 mmol/L,引物浓度为2.4pmol,Mg2+为1.5 mmol/L,Taq酶为0.5 U,筛选各引物最适宜的退火温度,经2.0%琼脂糖凝胶电泳检测,扩增条带清晰,优化后的SSR反应体系稳定性好,可用于马铃薯遗传多样性分析。

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