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棉粕发酵样品总DNA的提取方法

文献类型： 中文期刊

作者： 汤江武 1 ; 王新 1 ; 姚晓红 1 ; 吴逸飞 1 ; 许尧兴 1 ; 柳永 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所

关键词： 棉粕;微生物发酵;DNA提取;PCR-DGGE

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2010 年 22 卷 04 期

页码： 408-413

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 棉粕是我国重要的饲用蛋白质原料,采用微生物发酵原棉粕脱毒是当前重要的高效技术手段。为了使用分子生态学方法监测微生物发酵棉粕的过程,优化发酵工艺,试验先以脱色缓冲液去除棉粕发酵样品中的游离棉酚及色素类杂质,继之以溶菌酶—SDS—蛋白酶K温和裂解,提取获得总DNA产量达1.8~6.4μg/g棉粕样品(湿),DNA的提取效率达89%以上,片段大小均在23 kb左右,不经纯化即可直接进行PCR扩增和限制性酶切。以该DNA为模板扩增16S rRNA V3区片段,可用DGGE分析棉粕发酵过程中细菌群落结构的变化。该方法是一种适用于棉粕发酵样品总DNA提取的简便、可靠方法。

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