文献类型： 中文期刊
作者： 申爱娟 1 ; 陈松 2 ; 周晓婴 2 ; 戚存扣 2 ;
作者机构： 1.南京农业大学农学院
2.国家油料作物改良中心南京油菜分中心
关键词： 转基因油菜;旁侧序列;事件特异性检测
期刊名称： 江苏农业学报
ISSN： 1000-4440
年卷期： 2014 年 30 卷 01 期
页码： 14-20
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： W-4是通过农杆菌介导法将fad2基因的反向重复序列表达框转入甘蓝型油菜Westar后获得的转基因高油酸油菜品系。本研究应用温度不对称PCR(TAIL-PCR)技术扩增获得转基因油菜W-4的T-DNA插入位点的左、右旁侧序列。其中右边界旁侧序列长度为290 bp,其碱基组成G+C含量为31.27%、A+T含量为68.73%;左边界旁侧序列长度为365 bp,其碱基组成G+C含量为32.6%、A+T含量为67.4%,表明该T-DNA整合在富含A/T区。依据左、右边界旁侧序列和转基因载体的T-DNA左右边界序列设计的2对特异性引物TLF/TLR和TRF/TRR,能从W-4基因组DNA中扩增出大小分别为485 bp和405 bp预期产物,而在其他转基因油菜、非转基因油菜的基因组DNA和空白对照中均无特异性扩增产物,据此建立了W-4的转基因事件特异性PCR检测技术。应用该检测技术可以从含有0.1%W-4基因组DNA的混合样品中扩增出特异产物,检测灵敏度达到0.1%。表明应用该技术可对W-4转基因事件进行特异性检测。
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