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甘蓝型油菜种子中G3PDH基因特异性表达的ihpRNA载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 张超 1 ; 付三雄 2 ; 陈松 2 ; 李大雄 3 ; 戚存扣 2 ;

作者机构： 1.南京农业大学

2.江苏省农业科学院

3.贵州省油料研究所

关键词： 甘蓝型油菜;甘油-3-磷酸脱氢酶;ihpRNA载体

期刊名称： 贵州农业科学

ISSN： 1001-3601

年卷期： 2014 年 09 期

页码： 37-42

收录情况： 北大核心

摘要： 为验证甘蓝型油菜甘油-3-磷酸脱氢酶基因(G3PDH)的功能,采用PCR的方法克隆BnG3PDH557bp的干扰靶序列,将其正向片段插入到中间载体pHurricane的NotI酶切位点、反向重复序列插入到XhoI酶切位点,构建ihpRNA载体反向重复框,BamHI、EcoRI酶切下反向重复框后组装到由种子特异性表达的napin启动子驱动的pCAMBIAl390植物表达载体上。结果表明:PCR扩增产物、限制性内切酶酶切产物与预期片段长度相符。其中,1.7kb的片段包括正向干扰靶片段和部分AtFad2内含子序列,2.3kb大小的片段是干扰反向重复框。种子特异性表达的BnG3PDHihpRNA载体成功构建。

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