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piggyBac转座子在绒山羊基因组中的整合位点及其特征分析

文献类型： 中文期刊

作者： 白丁平 1 ; 方堃 1 ; 杨明明 1 ; 屈雷 2 ; 陈玉林 1 ;

作者机构： 1.西北农林科技大学动物科技学院

2.榆林学院陕西省陕北绒山羊工程技术研究中心

关键词： piggyBac;绒山羊;基因组;整合位点

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2012 年 45 卷 05 期

页码： 958-965

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】构建piggyBac(PB)转座子表达载体系统,研究PB转座子在绒山羊基因组中的整合位点。【方法】构建pB-CMV-EGFP-Neo转座载体和pcDNA-Trans辅助载体,利用lipofectamine 2000介导共转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得稳定转染的转基因细胞系。提取转基因细胞基因组DNA,利用反向PCR检测piggyBac转座子整合位点。【结果】构建了转座系统并成功介导外源基因在绒山羊成纤维细胞染色体中整合,获得了转基因细胞系;反向PCR检测显示在绒山羊基因组中有21个PB转座子整合位点;整合位点TTAA毗邻一侧的5个碱基组成中,PB转座子3′倾向于插入到富含AT(58.35%)碱基的区域,PB转座子5′倾向于插入到富含GC(57.8%)。【结论】PB转座子可在绒山羊基因组中发生高效转座,获得的整合位点信息可为利用PB转座子开展绒山羊研究提供理论参考。

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