文献类型： 中文期刊

作者： 李冬梅 ¹ ; 操君喜 ¹ ; 朱根发 ¹ ; 吕复兵 ¹ ; 孙映波 ¹ ; 王真 ¹ ;

作者机构： 1.广东省园林花卉种质创新与利用重点实验室/广东省农业科学院花卉研究所

关键词： 兜兰;二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因;RT-PCR;基因克隆;表达分析

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2012 年 28 卷 28 期

页码： 203-210

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 克隆同色兜兰二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因DFR,分析其序列特征,了解其在不同组织部位的表达情况。采用RT-PCR和RACE技术从花中克隆DFR的全长cDNA,用生物信息学方法分析序列特征,并用半定量RT-PCR研究其在不同组织的表达。分离到DFR,该cDNA全长1267bp,具有1个1074bp的完整开放阅读框,编码357个氨基酸。序列分析表明,该DFR蛋白含有1个NADB_Rossmann superfamily保守结构域,1个NADP(H)结合域和1个底物特异性结合域,其与文心兰、石斛兰和大花蕙兰等的DFR同源性在75%～80%。系统进化树显示,该DFR蛋白与兰科植物的DFR蛋白亲缘关系比较近。半定量RT-PCR表明,该DFR在成熟花和营养叶中的表达量最高,在子房、苞叶、萼片和花瓣中的表达量相当,在唇瓣中的表达量次之,在蕊柱中的表达量较唇瓣中的低,在花茎中的表达量最低,在根中几乎检测不到。原核表达结果表明,该DFR在大肠杆菌中获得表达。从兜兰中克隆到花色代谢途径中的关键酶基因DFR,该基因可能参与调控花色素的合成。