文献类型： 中文期刊
作者： 崔文娟 1 ; 林玉红 1 ; 欧巧明 1 ; 石有太 1 ; 罗俊杰 1 ;
作者机构： 1.甘肃省农业科学院生物技术研究所
关键词： 兰州百合;DNA提取;RAPD-PCR;体系优化
期刊名称： 甘肃农业科技
ISSN： 1001-1463
年卷期： 2017 年 01 期
页码： 8-12
摘要： 以兰州百合鳞片和叶片为试材,采用改良CTAB法获得了高质量的基因组DNA。为优化兰州百合RAPD-PCR反应体系,利用正交试验设计,对兰州百合RAPD-PCR反应体系中的5种主要因素进行4水平共计16个组合设计,并选用3种反应程序,通过琼脂糖凝胶电泳结果分析,最终获得最佳反应体系为:20 u L反应体系中含30 ng模板DNA、0.5μmol/L随机引物、0.2 mmol/L d NTPs、2.25 mmol/L MgCl_2,及1.5U Taq DNA聚合酶。最佳反应程序:94℃预变性4 min;94℃变性1 min,36℃退火1.5 min;72℃延伸2 min;35个循环;最后72℃延伸7min。
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