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香蕉ROP1基因酵母双杂交体系的诱饵载体构建及毒性与自激活效应检测

文献类型： 中文期刊

作者： 王卓 1 ; 杨景豪 1 ; 张建彬 1 ; 刘菊华 1 ; 金志强 1 ; 徐碧玉 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： ROP1基因;酵母双杂交;诱饵载体;构建;检测

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2009 年 30 卷 07 期

页码： 88-91

收录情况： CSCD

摘要： 用PCR技术获得香蕉ROP1基因片段,构建酵母双杂交系统表达载体pGBKT7-ROP1,测序正确后将重组质粒导入AH109酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用。结果表明,用PCR技术获得了正确的ROP1基因片段,并正确构建了ROP1基因的酵母双杂交表达载体,并转化到AH109酵母菌株中,含诱饵载体的AH109在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,说明表达产物对酵母细胞无毒性,含诱饵载体的AH109在His、Trp二重营养缺陷平板上不能生长,说明对报告基因无自激活作用,为下一步利用酵母双杂交系统筛选与ROP1蛋白相互作用的蛋白奠定基础。

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