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蜜柚间座壳黑点病菌(Diaporthe citri)LAMP可视化检测技术的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 赖宝春 1 ; 姚锦爱 2 ;

作者机构： 1.漳州市农业科学研究所

2.福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省作物有害生物绿色防控工程研究中心/福建省农业科学院植物保护研究所

关键词： 蜜柚;黑点病;间座壳菌;环介导等温核酸扩增技术;检测

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2022 年 37 卷 011 期

页码： 1470-1475

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的] 建立一种蜜柚间座壳黑点病菌快速、简便、灵敏的LAMP(Loopmediated isothermal amplification)可视化检测方法,在植株表现症状之前或初期实现病原菌的监测,为病害的早期监测、诊断及防治提供依据.[方法] 以EF-1a(Elongation factor-1α)基因序列为靶序列,设计了一套LAMP特异性引物;以蜜柚黑点病菌DNA为模板,优化反应温度和反应时间,建立LAMP检测反应体系,开展特异性和灵敏度验证及田间病株检测.[结果] 建立的LAMP反应体系可特异有效地检测出蜜柚黑点病菌.该体系最佳反应温度、反应时间分别为65 ℃和60 min.灵敏度验证结果表明,LAMP检测最小质量浓度为10 fg·μL?1.采用LAMP法对15份疑似蜜柚黑点病田间样本进行快速检测,检出率为100%.[结论] 本研究建立的蜜柚间座壳黑点病菌LAMP快速检测方法不仅特异性强、灵敏度高,且检测结果可视,可用于田间黑点病菌的实时监测和快速检测.

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