文献类型： 中文期刊

作者： 梁力荣 ¹ ; 柯海意 ² ; 臧莹安 ¹ ; 翟少伦 ³ ; 康桦华 ³ ; 蒋智勇 ³ ; 李艳 ³ ; 张昆丽 ³ ; 周霞 ³ ; 勾红潮 ³ ; 李春玲 ³ ;

作者机构： 1.仲恺农业工程学院

2.广东省高州农业学校

3.广东省农业科学院动物卫生研究所

关键词： FliC蛋白;伪狂犬病病毒弱毒疫苗;黏膜免疫

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2025 年 52 卷 010 期

页码： 4864-4873

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]探讨FliC蛋白作为黏膜佐剂对伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)Bartha-K61弱毒疫苗株的免疫增强作用,为PRV黏膜疫苗的研发奠定基础.[方法]将鼠伤寒沙门菌FliC基因克隆连接至原核表达载体pET-28a(+),连接产物转化大肠杆菌Trans10感受态细胞,提取质粒后进行双酶切鉴定并测序;将FliC-pET-28a转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达FliC蛋白,通过考马斯亮蓝染色和Western blotting对纯化后的FliC蛋白进行鉴定.设置Bartha-K61病毒液组和商品化Bartha-K61疫苗组作为对照,将FliC蛋白作为黏膜佐剂与 Bartha-K61病毒液混合,滴鼻2次免疫BALB/c小鼠,测定免疫前(0 d)、免疫后7、14、21、28和35 d小鼠血清IgG和IgA水平,免疫后第35天对各组小鼠分别滴鼻PRV GD-WH病毒液104.5 TCID50,攻毒后每日观察并记录小鼠生存状况.[结果]成功获得重组质粒FliC-pET-28a,实现了 FliC蛋白的可溶性表达,纯化后的FliC蛋白大小约为58 ku.小鼠免疫试验结果显示,二免后Bartha-K61病毒液+FliC蛋白组血清IgG和IgA抗体均显著高于Bartha-K61病毒液组和商品化Bartha-K61疫苗组(P<0.05).攻毒保护试验结果显示,Bartha-K61病毒液+FliC蛋白免疫能给小鼠提供100%的保护力,抵抗PRV GD-WH的致死性攻击,具有高于Bartha-K61病毒液单独免疫的保护力.[结论]FliC蛋白佐剂对PRV Bartha-K61弱毒疫苗株具有黏膜免疫增强作用,并使小鼠获得一定的免疫保护效力.