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宏基因组中新角蛋白酶基因KerA的克隆与鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 马建 1 ; 许诺 2 ; 王英哲 3 ; 王云鹏 1 ; 刘艳芝 3 ;

作者机构: 1.吉林农业大学农学院

2.吉林省农业科学院农业生物技术研究所吉林大学生命科学学院

3.吉林农业大学农学院温州大学生命科学研究院吉林省农业科学院农业生物技术研究所

关键词: 宏基因组;皮革鞣制;角蛋白酶;KerA基因;基因工程重组

期刊名称: 黑龙江畜牧兽医

ISSN: 1004-7034

年卷期: 2017 年 05 期

页码: 37-40

收录情况: 北大核心

摘要: 皮革鞣制过程中产生大量有害物质,对环境造成了严重污染。角蛋白酶是一类水解角蛋白的酶,是皮革鞣制中理想的鞣制剂替代品。为了发掘角蛋白酶重要的基因资源,试验从土壤中克隆KerA基因,构建了原核表达载体p ET-22b-KerA,通过热激法转入BL21(DE3)中进行表达并在表达时间上进行了优化,对表达的产物进行Western-blot鉴定,通过Ni2+Sepharose Fast Flow分离纯化了KerA,并通过水解角蛋白验证其活性。结果表明:克隆的KerA基因可以在原核中表达,并具有水解角蛋白的活性。说明基因工程重组手段生产KerA具有可行性。

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