文献类型： 中文期刊
作者： 王建荣 1 ; 杨颐 1 ; 龚晓磊 1 ; 张平 1 ; 顾朝旭 1 ; 赵洪兴 1 ;
作者机构： 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 反转录；互补DNA；聚合酶链反应；猪生长激素基因
期刊名称： 上海农业学报
ISSN： 10003924
年卷期： 1994 年 02 期
页码：
摘要： 以猪垂体ｍＲＮＡ为模板，Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）（１２～１８）为反转录引物，在ＡＭＶ－ＲＴ的催化下，先合成ｃＤＮＡ第一链，再以ＲＮａｓｅＨ降解的ｍＲＮＡ小分子为引物、ｓｓ－ｃＤＮＡ为模板，在Ｅ．ｃｏｌｔＤＮＡＰｏｌ．Ｉ的催化下合成ｃＤＮＡ第二链，并用Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡｌｉｇａｓｅ连接缺口和Ｔ４ＤＮＡＰｏｌ补齐末端，以获得长度完整的ｄｓ－ＣＤＮＡ分子。根据已知的ｐＧＨ基因序列，设计并合成了一对特异引物分子，以总ｃＤＮＡ为模板，进行ＰＣＲ扩增，分子杂交证明，获得的扩增片段即为侧翼带有重组位点和附加密码的编码ｐＧＨ成熟肽的ＤＮＡ序列。
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