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甘薯SAAT法遗传转化条件的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 王欣 1 ; 周忠 2 ; 李强 1 ; 顾向华 1 ; 马代夫 1 ;

作者机构： 1.江苏徐州甘薯研究中心

2.徐州师范大学生命科学学院

关键词： 甘薯;遗传转化;声波辅助农杆菌遗传转化

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2006 年 22 卷 01 期

页码： 14-18

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： SAAT即声波辅助的农杆菌遗传转化方法。在遗传转化中,超声波处理可以在外植体上产生许多易于农杆菌进入的微小伤口和通道,从而提高转化率。该研究首次将SAAT法应用于甘薯遗传转化并对遗传转化体系进行优化,根癌农杆菌菌株为EHA101/pROA93(nptⅡ和gus),受体材料为甘薯品种栗子香的胚性悬浮细胞。结果表明,悬浮培养105 d,继代培养3 d,将经超声波处理30 s的胚性悬浮细胞侵染到OD600值稀释至0.5的对数生长期的EHA101菌液中10 m in,经4 d共培养后,GUS瞬时表达率最高,达到86.7%,稳定表达率为37.9%;转化时加入乙酰丁香酮亦能提高转化率;转基因植株筛选的适宜选择压为Kan 10 mg/L;适宜的抑菌剂为Carb 100 mg/L。

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