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组织特异RNAi转基因小鼠模型的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 代蓉 1 ; 沈思军 2 ; 甘尚权 1 ; 毛青青 1 ; 万鹏程 1 ;

作者机构： 1.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所

2.石河子大学动物科技学院

关键词： 组织特异;RNAi;转基因小鼠模型

期刊名称： 中国科学:生命科学

ISSN： 1674-7232

年卷期： 2011 年 04 期

页码： 289-295

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： RNAi是一种行之有效的基因沉默的新方法,被广泛地应用于基因功能的研究、疾病的治疗以及新型疫苗的研制等领域.本研究通过原核显微注射干扰载体的方法制备转基因小鼠.选用皮肤组织特异表达的人源角蛋白14(K14)基因启动子(2000bp)作为表达载体启动子,成功地驱动融合表达载体EGFP-shRNA进行干扰片段前体的转录,进而生成成熟的干扰片段,靶向小鼠BMP4基因使其发生沉默.所得到的转基因小鼠及其杂交后代经PCR和Southern杂交鉴定,结果表明外源基因准确无误地整合到小鼠基因组.Northern杂交结果证明,小干扰RNA在皮肤组织中有较高水平的表达,在肺和肠组织中有较低水平的表达.研究结果表明,利用PolⅡ型(K14)启动子驱动shRNA融合转录本的表达,在特定组织高表达siRNA,从而达到抑制特定组织目的基因表达的技术路线是可行的.同时为利用K14启动子进行毛囊相关基因干扰研究积累了基础数据,为制备组织特异抑制基因表达的转基因大家畜提供了一个参考方法.

  • 相关文献

[1]PolⅡ型启动子K14实现组织特异RNAi. 代蓉,沈思军,万鹏程,石国庆,孟庆勇,刘守仁. 2011

[2]绵羊FGF5基因的克隆、表达及RNA干扰. 刘伍限,贾斌,石国庆,任建功,刘卡,马润林. 2011

[3]应用RNA干扰技术抑制捻转血矛线虫H11基因研究. 张平,何延华,王新华,薄新文,陈南颍,韩猛立. 2013

[4]BMP4对小鼠毛囊数量的影响. 毛青青,代蓉,沈思军,郭洪,万鹏程,周平,石国庆. 2012

[5]Knockdown of IGF-IR by siRNA injection during bovine preimplantation embryonic development. Wang, L. M.,Wen, J. X.,Yuan, J. L.,Cang, Ming,Liu, D. J.,Wang, L. M..

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