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海藻糖合酶基因的克隆及其植物表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 张树珍 1 ; 郑学勤 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室

关键词： 海藻糖合酶基因;PCR;植物表达载体

期刊名称： 生命科学研究

ISSN： 1007-7847

年卷期： 2000 年 4 卷 02 期

页码： 130-135

收录情况： CSCD

摘要： 从担子菌灰树花的菌丝体中提取总 RNA,并纯化出 m RNA,m RNA经反转录合成c DNA第一链 ,以 c DNA第一链为模板经 PCR扩增海藻糖合酶 ( Tsase)基因 ,获得一长约2 .2 kb的片段 ,把该片段连接到 p GEM○R- T- easy vector上进行测序 ,其全长共 2 1 99bp.随后将此片段以正向插入植物表达载体 p BI1 2 1的 35S启动子和 NOS终止子之间 ,构建了一植物表达载体 p BT;又把 ubi- L启动子插入 p BI1 2 1的 H ind + Xbal位点构建 p UB,再把海藻糖合酶基因以正向插入载体 p UB的 Bam H1 + Sst1位点构建了另一植物表达载体 p UBT.

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