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抗病转基因水稻M12及其产品成分的定性、定量PCR检测方法

文献类型: 中文期刊

作者: 李鹏 1 ; 张琳 1 ; 叶吉妮 1 ; 贺诗瑶 1 ; 贾军伟 1 ; 潘爱虎 1 ; 唐雪明 1 ;

作者机构: 1.上海市农业科学院生物技术研究所/上海市农业遗传育种重点实验室;复旦大学生命科学学院;莱芜职业技术学院;台州学院生命科学学院

关键词: 品系特异性;定性PCR;定量PCR;M12

期刊名称: 作物学报

ISSN: 0496-3490

年卷期: 2018 年 07 期

页码: 949-955

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 通过定性PCR扩增了转基因水稻M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段,将PCR产物酶切连接后构建到T载体,得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子p M12,建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法。定性PCR结果表明,本方法可特异性检测出M12,检测限可达100拷贝单倍体水稻基因组;定量PCR结果表明,M12和sps定量PCR标准曲线R2为0.998和0.997,扩增效率为95.3%和108.4%,重复性分析标准偏差范围为0.043~0.276,定量极限和检测极限可达100和10拷贝。对转基因含量为1.0%的混合样品定量结果的相对偏差在8.0%以内。本研究建立的方法可用于转基因水稻M12及其加工产品成分的检测。

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