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毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株微线蛋白-2基因在大肠杆菌的表达

文献类型: 中文期刊

作者: 覃宗华 1 ; 谢明权 1 ; 蔡建平 1 ; 艾哈迈德 2 ; 彭新宇 1 ; 魏文康 1 ; 吴惠贤 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院兽医研究所

2.华南农业大学兽医学院

关键词: 毒害艾美耳球虫;微线蛋白-2基因;表达

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2005 年 25 卷 01 期

页码: 22-25

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据克隆的毒害艾美耳球虫 (Eimeria necatrix)广东株微线蛋白 - 2基因 (En MIC- 2 (Gd) )的 c DNA序列设计特异性引物 ,用 PCR方法扩增其阅读框架 (ORF)后 ,克隆至质粒表达载体 p ET- 32 a(+) ,成功构建了重组表达质粒 p ET-32 a(+) - En MIC- 2。用 Ca Cl2 法将其转化至宿主细菌 E.coli BL2 1(DE3) ,并用 IPTG成功诱导了 En MIC- 2重组抗原在大肠杆菌表达。表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的 10 .8% ,其相对分子质量约为 5 5 0 0 0。重组蛋白经 SDS- PAGE分析后 ,用 E.necatrix(广东株 )感染鸡的高免血清进行 Western Blotting分析 ,结果为阳性

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