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分离和鉴定油菜D型MAP激酶基因BnMPK9

文献类型： 中文期刊

作者： 余舜武 1 ; 张利达 2 ; 刘国兰 1 ; 罗利军 1 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院

2.上海交通大学植物生物技术研究中心

关键词： BnMPK9;油菜;非生物胁迫;酵母表达

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2013 年 39 卷 003 期

页码： 440-448

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了应对不良的外界环境,植物形成了一整套复杂的信号网络体系以适应变化的外界环境.其中MAPK级联是其中一个重要而保守的信号传导系统.采用RT-PCR策略,从干旱处理的油菜cDNA中克隆出全长的细胞分裂原激活的蛋白激酶基冈.该基因被命名为BnMPK9(GenBank登录号为AY737714),包含一个蛋白激酶区和一个保守的CD区.该基凶与拟南芥AtMPK9高度同源,其激酶的磷酸化位点为TDY同为D型MAPK亚家族基因.Southern blot结果表明该基因在油菜基因组中拷贝数不少于2个.Northern blot结果显示该基因能在不同的植物组织中表达.其表达受到甘露醇、紫外线和双氧水诱导上调表达,但低温和水杨酸处理后下调表达.实时RT-PCR分析表明,甘露醇和双氧水能长时间诱导该基因高表达.在油菜根中,甘露醇也能促进其上调表达.BnMPK9连接到pYES2.1酵母表达载体中转化酵母,发现增强了酵母对600mmolL-1 甘露醇和0.2mmolL-1 tBuOOH的抗性.以上结果说明BnMPK9是MAPK基因家族中的一员,涉及真核生物细胞渗透和活性氧胁迫,并增强其抗性.

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