文献类型： 中文期刊

作者： 郑雅楠 ¹ ; 王媛媛 ² ; 陈井生 ³ ; 朱晓峰 ⁴ ; 陈立杰 ⁴ ; 段玉玺 ⁴ ;

作者机构： 1.沈阳农业大学林学院

2.沈阳农业大学生命科学技术学院

3.黑龙江省农业科学院大庆分院

4.沈阳农业大学植物保护学院

关键词： 大豆胞囊线虫;热激蛋白70;克隆;表达

期刊名称： 大豆科学

ISSN： 1000-9841

年卷期： 2012 年 31 卷 02 期

页码： 198-202

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR技术结合基因组步移技术,从大豆胞囊线虫(Heterodera glycines)中克隆了热激蛋白70基因(Hsp70)的全长cDNA序列(Hg-Hsp-70),全长1 953 bp,GenBank登录号为FJ816100.1。碱基序列分析结果表明,该序列含有9个外显子与8个内含子,与其它线虫具有较高的同源性。氨基酸序列分析表明,该基因编码650个氨基酸,相对分子量为70.7 kD,具有2个Hsp70基因家族的签名序列,与其它线虫的该基因氨基酸序列具有很高的同源性。构建了原核表达载体Hsp70pEASY-E1,采用IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳结果表明,当IPTG终浓度为0.2～1.2 mmol.L-1时均能显著诱导表达;以终浓度0.8 mmol.L-1的IPTG诱导5 h蛋白表达量达到最大值。