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牙鲆酵母双杂交cDNA文库的构建及文库质量鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 杨长庚 1 ; 刘姗姗 2 ; 孙冰 2 ; 陈松林 2 ;

作者机构: 1.中国海洋大学海洋生命学院

2.农业部海洋渔业可持续发展综合性重点实验室

关键词: 牙鲆:酵母双杂交;免疫相关基因;信号通路

期刊名称: 中国水产科学

ISSN: 1005-8737

年卷期: 2011 年 18 卷 06 期

页码: 1250-1258

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了研究牙鲆(Paralichthys olivaceus)免疫及抗病相关蛋白和大分子物质的功能及相互作用机制,构建了牙鲆酵母双杂交cDNA文库。原始文库滴度为1.6×106 CFU/mL,随机选取单克隆菌落进行PCR扩增,根据PCR扩增结果表明插入片段大部分大于500 bp,平均长度约为1.5 kb,随机调取了115个EST进行了序列测定。扩增后放大文库库容约为1.8×1012 CFU。转化酵母后,文库转化效率为3.6×105CFU/μg,文库库容为5.4×106CFU。牙鲆酵母双杂交文库的构建成功为鲆蝶类免疫机理的研究,尤其是信号分子通路研究提供有效的工具。

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