文献类型： 中文期刊
作者： 王祥 1 ; 张秀春 1 ; 余乃通 1 ; 梁洁 1 ; 周朋 1 ; 刘志昕 1 ;
作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
关键词： 香蕉束顶病毒;nsp基因;酵母双杂交;诱饵载体;自激活
期刊名称： 植物研究
ISSN： 1673-5102
年卷期： 2015 年 35 卷 05 期
页码： 741-745+790
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)DNA6编码的核穿梭蛋白(nuclear shuttle protein,NSP)在病毒的侵染、复制、运输中起重要作用。为了利用酵母双杂交系统研究BBTV DNA6与寄主香蕉蛋白的互作,本实验利用两对引物的PCR扩增得到BBTV nsp片段,混合各自PCR产物进行熔化退火可得到1/4两端含有EcoRⅠ和Bam HⅠ的酶切位点序列的DNA产物,将目的片段连接到酵母双杂交系统的p GBKT7诱饵载体中,成功获得p GBKT7-nsp,并将重组质粒p GBKT7-nsp转化入Y2H Gold酵母菌株中进行毒性检测和自激活验证。结果表明,p GBKT7-nsp没有自激活活性,同时对酵母细胞也无毒性,符合酵母双杂交诱饵质粒的要求,可用于下一步的蛋白互作实验。
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