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利用TAIL-PCR和RT-PCR技术克隆云芝植酸酶基因

文献类型: 中文期刊

作者: 杨帆 1 ; 林俊芳 1 ; 苗灵凤 2 ; 郭丽琼 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室

2.右江民族医学院

关键词: 云芝;植酸酶;TAIL-PCR;RT-PCR

期刊名称: 应用与环境生物学报

ISSN: 1006-687X

年卷期: 2006 年 12 卷 05 期

页码: 618-622

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 从采绒革盖菌(Coriolus versicolor,常被称为杂色云芝)中筛选到产植酸酶基因.根据植酸酶基因的保守序列设计引物P1、P2,从云芝中分离克隆植酸酶基因的片段.再在分离到的已知序列的5′端和3′端设计嵌套的特异引物SP1、SP2、SP3和SP1′、SP2′、SP3′,利用TAIL-PCR技术进行分离已知序列的侧翼序列.结合Blastn、ORF和Primer5.0软件,在侧翼序列上设计特异引物P3、P4,最终从云芝中分离克隆到全长的植酸酶基因B4.再在B4序列的基础上设计引物phyP rt1、phyP rt2,利用这两个引物通过RT-PCR技术从云芝中克隆到全长的植酸酶基因B5.通过分析,分离克隆到的植酸酶基因可能是新的基因.图4参12

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