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裸大麦PKABA1基因实时荧光定量PCR方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 吴昆仑 1 ; 邓晓青 1 ; 姚晓华 1 ;

作者机构: 1.青海省农林科学院/青海大学农林科学院/青海省高原作物种质资源创新与利用国家重点实验室培育基地/青海省裸大麦遗传育种重点实验室

关键词: 裸大麦;实时荧光定量;PCR扩增;标准曲线;PKABA1基因

期刊名称: 江苏农业科学

ISSN: 1002-1302

年卷期: 2012 年 40 卷 12 期

页码: 16-18

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据GenBank上小麦(M94726)、大麦(AB058924)和黑麦(DQ295068)的蛋白激酶外显子3的编码基因的同源序列比对,设计基因PKABA1的引物,建立了用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测裸大麦PKABA1基因在不同低温处理时间下mRNA表达量的方法。以样本循环数为纵坐标、以稀释倍数的对数为横坐标建立标准曲线,其相关系数(r2)达到了0.996,扩增效率99%,熔解曲线分析结果显示产物为特异的单峰,退火温度为(80.5±0.5)℃。结果表明,裸大麦PKABA1基因在不同低温处理时间下的表达量稳定,其实时荧光定量PCR法扩增效率高、特异性强、线性范围广、检测周期短,为PKABA1基因作为内参基因进行裸大麦功能基因表达的定量分析奠定了基础。

  • 相关文献

[1]小麦条锈菌实时荧光定量PCR检测方法的建立. 刘耀霞,张学飞,闫佳会,姚强,郭青云. 2022

[2]青海特色作物裸大麦(青稞)的开发及利用. 任又成. 2015

[3]淀粉和蛋白质组成对裸大麦面条食用品质的影响. 刘新红,党斌,吴昆仑,迟德钊. 2014

[4]不同生态区农艺措施对裸大麦产量的影响. 张志斌. 2013

[5]一步法和两步法RT-PCR对裸大麦β-actin基因的检测. 吴昆仑,邓晓青. 2012

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