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马铃薯甲虫RNA干扰高效致死基因的筛选

文献类型: 中文期刊

作者: 米热古丽·胡尔西达 1 ; 付开赟 2 ; 徐晴玉 3 ; 吐尔逊·艾合买提 4 ; 丁新华 4 ; 何江 4 ; 郭文超 5 ;

作者机构: 1.新疆农业大学农学院

2.新疆农业科学院植物保护研究所/农业部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室

3.南京农业大学植物保护学院

4.新疆农业科学院植物保护研究所

5.新疆农业科学院微生物应用研究所

关键词: 马铃薯甲虫;RNA干扰;致死基因;dsRNA;LD50

期刊名称: 新疆农业科学

ISSN: 1001-4330

年卷期: 2019 年 56 卷 007 期

页码: 1277-1287

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: [目的]基于备选基因RNA干扰后的致死效果评价,筛选出高效致死基因.[方法]通过在赤拟谷盗中已的报导和相似性搜索获得马铃薯甲虫致死基因Ldpp1 alpha-96a、LdRpt3、Ldalpha snap、LdSrp54k、LdRpn6、LdRop、LdGawky、Ldshi、Ldcact、Ldinr-a,以及阳性对照基因LdA TPaseA和LdATPaseE,构建dsRNA表达载体,经饲喂马铃薯甲虫二龄幼虫不同浓度的dsRNA,分析对幼虫的20%取食剂量AD20、化蛹中量PD50和幼虫7d致死中量LD50,经分析和评估,筛选出高效致死基因.[结果]12个基因的dsRNA对马铃薯甲虫幼虫的AD20在1.18±0.10(μg/mL) ~ 61.07 ±10.17(μg/ mL);PD50在0.06 ±0.01(μg/ mL) ~ 31.20 ±1.89(μìg/mL);LD50在1.39 ±0.13(μg/mL) ~ 228.13 ±6.72(μg/mL).其中AD20最高与最低的基因分别为Ldinra、LdRpn6;PD50最高与最低的基因分别为Ldinr-a、LdGawky;LD0最高与最低的基因分别为Ldinr-a、Ldsrp54k.[结论]12个基因的dsRNA对马铃薯甲虫幼虫均有一定的抑制取食、抑制化蛹及致死活性.其致死活性随浓度增高而增大,表现出剂量依赖效应,与对照组存在显著差异.通过综合比较AD20和LD50,Ldalpha snap、LdRpn6、LdSrp54k、LdRpt3个基因的毒力较ATPaseE和ATPaseA更强,具有较高的生物活性.提出并推荐AD20和LD50是评价备选基因dsRNA对幼虫致死效果的关键指标.

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