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荔波连蕊茶GA2ox1基因的克隆及表达分析

文献类型： 中文期刊

作者： 肖政 1 ; 李纪元 2 ; 范正琪 2 ; 李辛雷 2 ; 殷恒福 2 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院园艺研究所/江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室

2.中国林业科学研究院亚热带林业研究所

关键词： 荔波连蕊茶;GA2氧化酶:实时荧光定量PCR;克隆

期刊名称： 林业科学研究

ISSN： 1001-1498

年卷期： 2016 年 29 卷 01 期

页码： 41-47

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]GA2氧化酶是赤霉素生物合成代谢过程中关键酶之一,GA2ox家族基因常被用于植物矮化基因工程育种。[方法]根据植物GA2氧化酶基因编码区的保守序列设计引物,以山茶属荔波连蕊茶嫩枝为材料,提取总RNA,进行RT-PCR。采用RACE技术扩增获得1 371 bp的GA2ox基因全长c DNA序列,命名为Cl GA2ox1(Gen Bank登录号KJ502290)。[结果]序列分析表明,Cl GA2ox1放阅读框(ORF)为1 002 bp,编码333个氨基酸,5’非编码区59 bp,3’非编码区310 bp。预测的蛋白质分子量为37.31 k D,等电点为5.92,具有GA2ox超基因家族的保守结构域和特有的氨基酸残基。Cl GA2ox1蛋白与Gen Bank中收录的其它植物GA2ox蛋白氨基酸的相似性达到80%。构建系统进化树,结果显示山茶GA2氧化酶与烟草GA2ox蛋白的亲缘关系最为密切。实时定量PCR结果显示,该基因在荔波边蕊茶不同器官及发育不同时期的均有表达,表达量有所不同:Cl GA2ox1基因在2年生茎段中的表达量最高,在嫩枝和根中也有较高的表达,而在新抽生的嫩叶中最低。[结论]试验结果为进一步明确Cl GA2ox1基因的功能特征及揭示其参与调控植物生长的分子机制奠定基础。

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