文献类型： 中文期刊
作者： 高方方 1 ; 吴忠义 2 ; 黄丛林 2 ; 孙惠生 3 ; 曾申明 1 ;
作者机构： 1.中国农业大学动物科技学院
2.北京市农林科学院生物中心
3.北京中际国华马铃薯开发中心
关键词： 马铃薯Y病毒脉坏死株系;原核表达;多克隆抗体;ELISA
期刊名称： 中国农学通报
ISSN： 1000-6850
年卷期： 2008 年 24 卷 03 期
页码： 82-86
收录情况： 北大核心
摘要： 【目的】制备马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)多克隆抗体,建立间接ELISA法用于检测PVYN病毒。【方法】依据PVYN的CP基因序列设计引物,利用RT-PCR方法获得CP基因并连接构建到原核表达载体,进行原核表达,以纯化的重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得PVYN的抗血清并纯化。【结果】测序结果与其他已知序列比较,PVYNCP基因的核苷酸同源性95%,推断氨基酸的同源性达98%。以纯化蛋白为抗原进行免疫,成功获得了PVYN外壳蛋白抗血清,纯化后的IgG采用间接ELISA法检测抗原,抗体效价达1:500,使用该抗体稀释度检测感染植株,结果呈阳性。【研究结论】通过分子生物学途径获得了PVYN的多克隆抗体,建立的间接ELISA方法可以用于PVYN的病毒检测。
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