文献类型: 中文期刊
作者: 张丽丽 1 ; 徐碧玉 1 ; 刘菊华 1 ; 贾彩红 1 ; 张建斌 1 ; 金志强;
作者机构: 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
关键词: MaASR1基因;原核表达;生物信息学;蛋白质纯化
期刊名称: 江苏农业学报
ISSN: 1000-4440
年卷期: 2017 年 33 卷 005 期
页码: 1129-1135
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了深入研究MaASR1基因的分子生物学功能,利用RT-PCR技术从拟南芥转基因株系L14中克隆到MaASR1基因的cDNA序列,该序列含有1个432 bp的开放阅读框,编码143个氨基酸的蛋白质,并对该序列进行了生物信息学分析.将该基因克隆到原核表达载体PET-30a中,经酶切和测序鉴定后,将正确的重组质粒pET30a-MaASR1导入大肠杆菌BL21(DE3),成功构建了该基因的原核表达载体.利用所构建的原核表达载体进行原核表达,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳检测,结果表明表达蛋白质与预期蛋白质大小基本一致.利用Ni柱亲和层析方法进一步获得了纯度较高的重组蛋白质,并用Western blot方法确定此重组蛋白质为目的蛋白质.
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