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南方水稻黑条矮缩病毒SP7-1植物表达载体的构建及遗传转化

文献类型： 中文期刊

作者： 苑侠 1 ; 孙枫 2 ; 卢嫣红 2 ; 周彤 2 ; 范永坚 1 ; 周益军 2 ;

作者机构： 1.南京农业大学

2.江苏省农业科学院植物保护研究所

关键词： 南方水稻黑条矮缩病毒;SP7-1基因;拟南芥;转化

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2012 年 28 卷 06 期

页码： 1278-1282

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 克隆南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的SP7-1基因,构建植物表达载体并转化拟南芥,为研究SP7-1致病机理提供基础。根据已发表的SRBSDV SP7-1序列,设计特异性引物,通过RT-PCR的方法从感病水稻植株中克隆到完整的SP7-1基因。通过酶切连接,构建了SP7-1植物表达载体pCHF3/SP7-1,通过农杆菌介导的花序浸润法转化野生型拟南芥,获得转化植株T0代种子。对收获的T0代种子进行卡那霉素筛选,获得了4株阳性植株。阳性植株的PCR和RT-PCR分析检测结果表明,构建的SP7-1载体已成功转化拟南芥,病毒SP7-1已经整合至拟南芥基因组中并能正常表达。

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