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矮牵牛花特异表达启动子PchsA的克隆及蓝色基因F3′5′H表达载体的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 李吉莲 1 ; 姚宁涛 1 ; 祝建波 1 ; 邓福军 2 ;

作者机构: 1.石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室

2.新疆农垦科学院棉花所

关键词: 矮牵牛;PchsA启动子;克隆;蓝色基因F3′5′H;表达载体

期刊名称: 安徽农业科学

ISSN: 0517-6611

年卷期: 2009 年 37 卷 17 期

页码: 99-101

收录情况: 北大核心

摘要: [目的]克隆花特异表达启动子PchsA,将此启动子与蓝色基因"F3′5′H"构建新的表达载体,拟以该启动子驱动"F3′5′H"在其他花色中特异表达。[方法]根据GenBank报道的矮牵牛启动子的序列设计并合成一对特异引物,以蓝紫色矮牵牛总DNA为模板,用PCR仪扩增目的片段。[结果]PCR扩增出的启动子DNA片段长约550 bp,回收后连接到PGM-T质粒载体上,经转化、筛选确定重组子,酶切鉴定后送上海生工生物工程公司测序,得到片段长度为553 bp。经DNAMAN软件分析和GenBank上BLAST序列比对,显示序列与已报道序列同源性为98.55%。应用pcgene软件进行序列分析,结果表明试验克隆的启动子含有启动子所必须的所有调控元件,这与报道的序列基本一致。[结论]试验成功地克隆了CHSA启动子并将其与"F3′5′H"构建成能够在植物中进行遗传转化的表达载体,为培育新型花色新品种奠定了基础。

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