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穿刺巴斯德芽菌荧光定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 贺乐 1 ; 黄惠琴 2 ; 朱军 2 ; 刘敏 2 ; 孙前光 2 ; 鲍时翔 2 ;

作者机构: 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词: 穿刺巴斯德芽菌;实时荧光定量PCR;定量检测

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2013 年 39 卷 01 期

页码: 104-108

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以穿刺巴斯德芽菌16SrDNA片段为靶标,通过对荧光定量PCR反应条件的摸索,建立该菌的荧光定量PCR检测方法。所选靶点最适退火温度60℃,正、反向引物的最佳浓度搭配为900、300nmol/L;以Ct值和质粒拷贝浓度对数为坐标轴建立标准曲线,回归方程为y=-3.200×logx+34.43,R2值为0.998,PCR扩增效率为105.4%,对含穿刺巴斯德芽菌芽胞的土壤样品检测阈值为2×103个/g土壤。该方法敏感度高、特异性好,能够运用于穿刺巴斯德芽菌的定性、定量检测。

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