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猪繁殖候选基因Lhx8的原核表达及条件优化

文献类型: 中文期刊

作者: 王晶晶 1 ; 毛慧 1 ; 陈琳 1 ; 何闪 1 ; 潘雪男 1 ;

作者机构: 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 猪;Lhx8基因;原核表达;条件优化

期刊名称: 上海农业学报

ISSN: 1000-3924

年卷期: 2015 年 04 期

页码: 54-57

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以猪卵巢组织的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增猪Lhx8基因完整的开发阅读框,将该基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建了原核重组质粒pET28a(+)-Lhx8。将重组质粒转化Rosetta(DE3)菌株,经IPTG诱导表达及SDS-PAGE检测后,发现1条特异的蛋白表达条带,分子量为37 kD左右。通过对IPTG浓度和诱导时间的优化,结果显示融合蛋白的最佳诱导浓度为0.4 mmol/L IPTG,最佳诱导时间为37℃诱导12h。

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