文献类型： 中文期刊
作者： 南相日 1 ; 刘文萍 1 ; 刘琦 1 ; 夏善勇 1 ;
作者机构： 1.黑龙江省农业科学院生物技术研究中心
关键词： 马铃薯;PLRV-CP基因;原生质体;克隆
期刊名称： 中国农学通报
ISSN： 1000-6850
年卷期： 2007 年 23 卷 07 期
页码： 106-109
摘要： 根据GenBank中的马铃薯卷叶病外壳蛋白基因(PLRV-CP)全序列,设计一对特异性引物,以马铃薯卷叶病毒RNA为模板,克隆了马铃薯卷叶病外壳蛋白基因,在pBI121的基础上构建了植物表达载体。利用PLO(Poly-L-Ornithine)将PLRV-CP基因导入到马铃薯加工型品种大西洋的原生质体中,获得了转基因后代。在5株转化后代中扩增出长度为610bp的目标DNA片断,说明导入的外源PLRV-CP基因已经整合到马铃薯基因组中。Southern blot分析结果进一步证明了PCR结果的正确性。RT-PCR结果表明,在3株转化后代叶片中具有阳性表达。马铃薯卷叶病毒接种实验结果表明,转基因植株比对照有明显的马铃薯卷叶病抗性。
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