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半滑舌鳎肝脏细胞系的建立与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 任国诚 1 ; 陈松林 2 ; 沙珍霞 3 ;

作者机构： 1.中国海洋大学海洋生命学院

2.农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室

3.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： 半滑舌鳎;肝脏细胞系;核型;GFP报告基因

期刊名称： 高技术通讯

ISSN： 1002-0470

年卷期： 2008 年 18 卷 06 期

页码： 111-114

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 以半滑舌鳎肝脏组织为材料,探索了组织细胞分离培养条件,建立了半滑舌鳎组织细胞培养技术及半滑舌鳎肝脏细胞系(HTLC)。该细胞系的培养基是添加了抗生素、胎牛血清(FBS)、花鲈血清(SPS)、成纤维生长因子(bFGF)的 MEM。HTLC 形态呈纤维状,在培养基中生长迅速,经200多天的培养,成功传代30多代。检测了温度、FBS 浓度、bFGF对其生长的影响,结果表明,在24～30℃生长良好,但当温度低于12℃时细胞生长速度明显减慢;在一定浓度范围内,其生长速度随血清浓度的升高而增快,血清浓度过高或过低对其生长不利;在培养基中添加 bFGF 可以使细胞生长速度显著提高;其二倍体核型为2n=21t。将绿色荧光蛋白(GFP)报告基因通过脂质体介导的方法转入 HTLC 中并成功地获得了表达,转化率为20%左右。该细胞系的建立为研究鱼类病毒学、免疫学、遗传学、功能基因组学提供了很好的实验材料。

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