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马铃薯无机焦磷酸酶基因cDNA在大肠杆菌中的表达及蛋白质特征分析

文献类型: 中文期刊

作者: 张宁 1 ; 司怀军 1 ; 柳娜 2 ; 李有忠 2 ; 刘海英 2 ; 文钢 1 ; 王蒂 2 ;

作者机构: 1.甘肃农业大学生命科学技术学院

2.甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室

关键词: 马铃薯;PPase基因;大肠杆菌;蛋白质特征

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2008 年 6 卷 06 期

页码: 85-88

收录情况: CSCD

摘要: 通过调节蔗糖代谢途径中的协同因子无机焦磷酸(PPi)可以调控马铃薯块茎的休眠和发芽特性。本研究将马铃薯无机焦磷酸酶(PPase)基因(GenBank Accession No.:EF091820)与载体pET-28a融合,构建了原核表达载体pET-PPA,然后导入大肠杆菌BL21(DE3)中,经SDS-PAGE分析表明PPase基因在大肠杆菌中能够表达。用生物学软件对PPase基因及其编码的蛋白质分析表明,该PPase基因与与茄属的同源性高达89%~97%,与其他物种PPase基因的同源性在77%~80%之间;系统进化树分析表明PPase与茄科茄属和藜科甜菜属的进化类群最接近;其编码的蛋白质具有多个磷酸化位点,没有跨膜区;蛋白质二级结构预测显示,有63个氨基酸可能形成α-螺旋结构,38个氨基酸可形成延长链;通过亚细胞定位可知,它主要是一种细胞质和线粒体基质蛋白。

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