文献类型： 中文期刊

作者： 刘秋凤 ¹ ; 曾令兵 ¹ ; 周勇 ² ; 马杰 ² ; 范玉顶 ² ; 张辉 ² ; 李瑞伟 ¹ ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命科学学院

2.中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词： 草鱼肾脏组织细胞系(CIK);草鱼呼肠孤病毒(GCRV);微载体;大规模培养;工艺与优化

期刊名称： 淡水渔业

ISSN： 1000-6907

年卷期： 2013 年 43 卷 04 期

页码： 69-75

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 研究了在悬浮培养系统中使用微载体Cephodex规模化培养草鱼肾脏组织细胞CIK和草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的条件并进行了优化。结果表明,Cephodex是一种适合CIK细胞贴壁生长的微载体,搅拌方式(搅拌时间/静止时间)及血清浓度(0%、5%、10%、15%)对CIK细胞在Cephodex微载体上的贴附效率有影响。贴附期以转速35 r/min、每静置45 min搅拌2 min的间歇搅拌方式最佳,8 h后细胞贴附率可达90%以上;细胞贴附期培养基中的血清浓度为5%。当Cephodex微载体用量10 mg/mL、细胞初始接种密度2.5×105cells/mL、连续搅拌速度40 r/min时可获得最佳的细胞生长效能。用优化的最佳工艺条件大规模培养CIK细胞,接种感染复数为0.1的GCRV病毒3 d后,培养细胞出现典型细胞病变效应,病毒滴度(lgTCID50/mL)为8.5。本项研究为草鱼出血病疫苗规模化制备技术研究奠定了基础。