文献类型： 中文期刊

作者： 舒雪密 ¹ ; 叶欢 ¹ ; 仲嘉 ¹ ; 张鸣 ¹ ; 罗江 ¹ ; 刘源 ¹ ; 杜浩 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词： 中华鲟;精原干细胞;超低温冷冻保存;解冻温度;抗氧化剂;抗冻蛋白

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2024 年 31 卷 007 期

页码： 745-753

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 中华鲟(Acipenser sinensis)是我国一级重点保护水生动物,其精原干细胞等种质资源冷冻保护技术尚不完善.本研究在前期建立的匙吻鲟(Polyodon spathula)精原干细胞冷冻保存液配方基础上,研究解冻温度、抗氧化剂和抗冻蛋白对中华鲟精原干细胞冷冻保存效果的影响,以期建立高效的中华鲟精原干细胞超低温冷冻保存方法.研究结果表明,实验设置的解冻温度(20、25、30 和 40℃)中 25℃组冷冻保存效果最佳:解冻后细胞数目为(3.86±0.51)×105,细胞存活率可达(96.36±0.53)%;比较不同浓度组(500、1000 和 1500 mg/L)的谷胱甘肽、抗坏血酸和α-生育酚等3种抗氧化剂对中华鲟精原干细胞冷冻保存效果的影响,结果显示,冷冻保存液中添加1000 mg/L α-生育酚的实验组,解冻后得到的细胞数目最多(7.64±0.34)×105,显著高于其他抗氧化剂添加组,细胞存活率可达(92.82±0.72)%;通过比较不同浓度(0.1、1.0 和 10 μg/mL)的两种类型抗冻蛋白(AFPⅠ和 AFPⅢ)对中华鲟精原干细胞的冷冻保存效果,发现添加了 1.0 μg/mL AFPI的实验组解冻效果最好,解冻后得到的细胞数目为(6.85±0.19)×105,显著高于其他实验组,细胞存活率为(86.89±0.73)%.综上所述,中华鲟精原干细胞冷冻保存的最佳解冻温度为 25℃,1000 mg/L α-生育酚作为抗氧化剂,和 1.0 μg/mL AFPI作为抗冻蛋白对其冷冻保存效果最佳.