文献类型： 中文期刊
作者： 贺云霞 1 ; 徐慧 1 ; 叶飞（等） 1 ;
作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所
关键词： 副猪嗜血杆菌;aroA;自杀载体
期刊名称： 黑龙江畜牧兽医
ISSN： 1004-7034
年卷期： 2011 年 27 卷 13 期
页码： 26-28
收录情况： 北大核心
摘要： 为了构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变自杀载体,试验采用自杀质粒介导的同源重组方法首先构建了自杀质粒pSD,根据副猪嗜血杆菌aroA基因设计PCR特异性引物,上游引物5'末端加BamHⅠ位点,下游引物5'末端加SalⅠ位点,PCR扩增aroA基因后连接到T载体,经酶切位点分析发现在aroA中有1个HindⅢ位点,将氯霉素表达盒通过该位点,构建T-aroA-cm载体,再通过BamHⅠ和SalⅠ将aroA-cm定向克隆到自杀质粒pSD中。结果表明:成功获得aroA基因插入突变自杀载体。说明进一步进行同源重组,从而构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变株。
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