文献类型: 中文期刊
作者: 李红 1 ; 刘成倩 1 ; 易建中 1 ;
作者机构: 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;CD163;230 000蛋白;原核表达
期刊名称: 中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2016 年 36 卷 08 期
页码: 1273-1277
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本研究旨在分析CD163受体与Marc-145细胞中230 000蛋白的相互作用区域。使用Scanprosite软件对MARC-145细胞的CD163蛋白结构和功能域进行预测,结合稀有密码子分析软件对CD163进行分段,分别构建原核表达载体pET-28α-(M1、M2、M3),利用镍柱纯化重组蛋白,通过免疫共沉淀分析分段蛋白M1、M2和M3与230 000蛋白的相互作用。经PCR、双酶切及测序鉴定表明所构建的原核表达载体是正确的;SDS-PAGE检验抗独特型单克隆抗体Mab2-5G2能够识别和沉淀MARC-145细胞中230 000蛋白;通过Western blot鉴定证明230 000蛋白与M1和M3蛋白相互作用。230 000蛋白与CD163蛋白相互作用位点主要在60~777,2 143~3120nt区域内,为深入探索CD163与230 000蛋白相互作用位点奠定基础。
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